Laboratoire de Jean Seb

Laboratoire

vous devirez pouvoir observer différentes choses avec ce microscope: pollens ? feuilles ?

Ce n'est pas le moment pour une pose thé ! Nous avons une mission !!!

vous avez trouvé des pièces de puzzle, allez vite les demander à notre équipe !

il semblerait que ce soit de vieux fossiles trouvés par Jean Sébastien...

Vous avez trouvé des pièces de puzzle, allez vite les demander à notre équipe !

Protocole:

Réaliser une empreinte de feuille

1) Poser le vernis:

-Etaler sur l'épiderme de la feuille une goutte de vernis sur une surface d'environ 0.5 cm de diamètre. Eviter les couches trop fines ( elles se cassent au prélèvement ) ou trop épaise ( elles sèchent trop lentement).

-Faire sécher le vernis.

2) Prelever les empreintes:

- Ne prélever les empreintes que si le vernis est sec.
- Soulever le bord d'une zone du vernis en le grattant légèrement avec une aiguille lancéolée.
- Décoller le vernis à l'aide d'une pince fine. Ne pas prélever un fraguement de forme parfaite, un lambeau suffit.

3) Réalisation d'une préparation microscopique:

- Déposer l'empreinte sur une lame, dans une goutte d'eau, face décollée vers le dessus, bien à plat, sans la froisser.
- Recouvrir d'une lamelle.

- Observer au microscope au grossissement permettant de voir l'empreinte des cellules.

une feuille

vernis à ongle incolore

dont

vous

Matériels

aurez

besoins:

COMPARAISON du résultat obltenue

Comparaison de l’observation microscopique des stomates du lierre

A présent, voici 3 autres observations au microscope de stomates qui viennent de différentes plantes appartenant à differentes serres.

Vous devez comparer votre observation avec celles ci-dessous:

serre désertique

serre tropicale

serre des écosystèmes

Protocole:

Purée de banane

Lyse des cellules

Elimination des débris

Précipitation de l’ADN

Visualisation de l’ADN

Suivre les étapes dans l'ordre:

d'Extraction et analyse d'ADN

Peler une banane
Couper la banane en 2
Écraser la moitié de la banane avec une fourchette dans un bécher

Cette étape permet de désagréger les tissus et de fragiliser les parois cellulaires.

Ajouter 50 ml d’H20, 2 cuillères à café de sel de cuisine et une cuillère de liquide vaisselle.
Mélanger délicatement avec la fourchette afin d’obtenir une mixture homogène.

Le détergent permet de lyser les cellules en dissolvant les membranes cellulaires. L’ADN est ainsi libéré. Le détergent permet également de débarrasser une partie des protéines liées à l’ADN. Le sel permet de neutraliser les charges négatives (portées par les groupements phosphates) de l’ADN en éliminant les molécules d’H2O qui entoure la double hélice. Cela permettra ainsi sa précipitation dans l’alcool.

Passer le mélange à travers un filtre à café. Le mélange est très visqueux. Pour faciliter la filtration il convient de presser le filtre pour faire passer la solution. Récupérer le filtrat
Refiltrer une deuxième fois à travers un nouveau filtre à café comme précédemment. Récupérer le filtrat.

La filtration permet de retenir les débris cellulaires et les morceaux de tissus non désagrégés.

Prélever 3 ml de filtrat et les transférer dans un tube 12 ou 15 ml.
En inclinant le tube, ajouter délicatement 8 ml d’alcool.
L’alcool reste au-dessus du filtrat. Ne pas secouer le tube

L’ADN précipite en formant une « pelote », qui remonte lentement à la surface.
A l’aide d’un cure-dent il est possible de prélever la pelote et de se rendre compte de l’aspect visqueux des filaments d’ADN.
Verser du Vert de méthyl pour colorer l'ADN.

L’alcool est de densité plus légère que l’eau reste au-dessus. L’ADN, insoluble dans l’alcool, va précipiter, formant un amas blanchâtre de filaments qui s’échappe de la phase inférieure. Tourner ou incliner délicatement le tube si l’ADN n’arrive pas sortir de cette phase. Il s’agit ici de millions de filaments d’ADN provenant de nombreuses cellules.

MINI JEU:

qui donne la banane

Où

est

Banane?

OUIII tu as trouvé!!! ;) Maintenant remets-toi en quête du Fameux voleurs(es)

NON ça c'est un Sandwich !!! Cherche encore

OOOH que c'est Mignon !!!

Protocole:relever des empreintes

Comment réaliser une empreinte:

- Prendre un peu de poudre magnétique dans le flacon en utilisant le pinceau. Pour bien imprégner les empreintes, la poudre doit idéalement former un disque d’environ 1 à 2 cm de diamètre au niveau du pinceau.

- DELICATEMENT, vous allez laisser tomber la poudre sur l'empreinte en tapotant sur le pinceau ;

- Puis avec le pinceau enlever l'excédents de poudre;

( ATTENTION !!! ne pas frotter le pinceau sur l'empreinte brutalement car elle risquerait de s'effacer et... Bye Bye Les preuves)

- Munissez-vous d’un rouleau adhésif (pour transférer l'empreinte).

- Découpez un bout suffisamment long (mais pas trop long), de manière à bien recouvrir l’empreinte. Arrangez-vous d’avoir un excédent d’adhésif avant et après l’empreinte.

- Avec le pouce et tout en appuyant suffisamment fort, coller peu à peu l’adhésif sur l’empreinte en déplaçant le pouce vers le bas. Cette technique doit vous permettre de relever l’empreinte sans bulles d’air piégées entre l’empreinte et l’adhésif.

- Ensuite, retirez délicatement l’adhésif de la surface.

- Munissez-vous d’une fiche cartonnée blanche. Collez l’extrémité de l’adhésif en bordure de la fiche. Cette technique doit vous permettre de relever l’empreinte sans bulles d’air piégées entre la fiche et l’adhésif.

- Ensuite, découpez la fiche de manière à ne garder que l’empreinte.

Matériel nécessaire :
– Poudre magnétique
– Pinceau
– Ruban adhésif
–Feuille blanche

Sequence

Ce cheveu est il à Jean-Sébastien ? une comparaison des séquences ADN pourrait vous aider à y voir plus clair...

Un site pourrait vous aider à ouvrir et comparer ces séquences, Jean-sébastien s'en sert souvent sur son ordinateur.

Laboratoire de Jean Seb

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