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Transcript

Monica Maria Figueroa Echeverri.Especialista en Microbiologia Clinca.MSc en Microbiologia Clinica

Bacteriologia II-IUCMA

Betalactamasas

8. tiempo de prueba e interpretacion9. Betalactamasa en disco.10. Betalactamasa en tubo11. Interpretacion de laboratorio12. Interpretacion Clinica13. Confirmacion de resultados negativos14. Prueba borde disco de penicilina.

1. Definicion de betalactamasa2. Fundamento3. No utilizar4. Interpretacion5. Disco de Nitrocefin (Cefinasa)6. Microorganimos7. Condiciones de la prueba

Índice

  • Las betalactamasas enzimas de naturaleza proteica
  • Tipo cromosómico
  • Hidrolizan el anillo B-lactámico dejándolo inactivo.

Las pruebas para beta-lactamasa determinan si los agentes Betalactamicos de espectro limitado (eje. penicilina y ampicilina) pueden ser utilizados para tratar unas pocas especies de bacterias.

NO DEBEN ser utilizadas para detectar BLEES, beta-lactamasas AmpC, metalo-beta-lactamasas, o carbapenemasas.

Las pruebas para beta-lactamasa

  • Con disco de Nitrocefina.
  • Utiliza un substrato cromegenico (cefalosporina).
  • Cambia de color si la amida del anillo betalactamico es hidrolizado por una betalactamasa

Prueba de betalactamasa cromogenica

  • Stapylococcus
  • Enterococcus faecalis
  • Neisseria gonorrhoeae
  • Haemophilus influenzae.
  • Moraxella catharralis
  • Algunos anaerobios.

Microorganimos a los que se les debe realizar la prueba de Betalactamasa

Colocar colonia directa en el disco y dejar a temperatura ambiente

La lectura de la prueba se debe dejar hasta 1 hora

Dejar el reactivo a temperatura ambiente 30 minutos antes de realizar la prueba

1.

Colonias de cultivos frescos de 18 a 24 horas de crecimiento

condiciones de la prueba:

Lectura de 1 minuto a 1 hora.

Tomar colonia con asa

coger disco de cefinasa

Colocar en porta objetos

Betalactamasa en disco:

Incubar de 20 minutos a 1 hora

Introducir disco de Nitroicefin

En 1 o 2 mL de Agua destilada

Realizar una suspencion de un cultivo fresco (18-24h)

betalactamasa en tubo:

  • Positiva: Cambio de color de amarillo a rosado.
  • Negativa: No hay cambio de coloración.

Interpretacion de Laboratorio:

Una prueba positiva es indicador de resistencia a penicilinas de espectro reducido: Amoxicilina, Ampicilina, Penicilina.(No suministrar)

interpretacion clinica:

Deben confirmarse con prueba de difusión de disco del borde de la zona de penicilina antes de reportar como susceptible.

RECOMENDACIONES DE LA CLSI PARA CONFIRMAR RESULTADOS NEGATIVOS EN S.aureus Y SCN

Borde DifusoNo produce betalactamasa

Borde Circular.Produce betalactamasa

A 35°C por 16 a 18 horas

Prueba negativa

Prueba positiva

Disco de penicilina de 10 unidades

Agar Mueller Hinton

dIFUSION DE DISCO DE BORDE DE PENICILINA

https://www.youtube.com/watch?v=qqTPHXnfSMA

VÍDEO

¡GRACIAS!