Analisis Coprológico MDP

Análisis coprológico parasitario

Métodos de Diagnóstico ParasitológicoMIDETROPEmma Carmelo Pascual

Preparación y procesamiento inicial de la muestra

VER

INICIO

SIGUIENTE

Tinción de Cromotropo

Toma de la muestra fecal

Concentración de Heces

Examen en fresco

Tinción de Ziehl Neelsen modificada

SIGUIENTE

ATRÁS

INICIO

Examen en fresco Fundamento: Se realiza para detección de trofozoitos protozoarios móviles, especialmente de Entamoeba histolytica, cuya viabilidad se ve afectada por los otros procedimientos de detección. La movilidad de los trofozoitos puede verse alterada por la demora en la realización de la prueba, la desecación y los cambios de temperatura, por lo que hay que proceder con rapidez, manteniendo húmeda la muestra y a una temperatura cercana a 37ºC. Examen en fresco 1. Bajo una campana apropiada, dispensar sobre un portaobjetos limpio una gota de suero salino, previamente atemperado a 37ºC. 2. Añadir una pequeña porción de heces (1 gota) y mezclar con el suero salino. 3. Colocar un cubre y observar rápidamente al microscopio para detectar la presencia de trofozoitos móviles Interpretación Los trofozoitos y quistes de E. histolytica suelen ser indistinguibles de los de E. dispar, considerada como no patógena.

Tinción tricrómica modificada para microsporidios Fundamento: Los microsporidios son un extenso grupo de parásitos intracelulares, de los cuales solo unas pocas especies se han demostrado infectando al ser humano (Encephalitozoon intestinalis, Enterocitozoon bieneusi, etc.). Esta tinción permite la detección de las pequeñas esporas del parásito, la fase infectiva que habitualmente se encuentra en las heces o la orina. Procedimiento: a) Preparación del colorante Cromotropo 2R 6.0 g Fast Green 0.15 g Ácido fosfotúngstico 0.7 g 1. Mezclar los componentes en 3 ml de ácido acético glacial y dejar reposar durante 30 minutos. 2. Añadir 100 ml de agua destilada. b) Tinción. 1. Bajo una campana apropiada, tomar una pequeña cantidad (una gota) de heces frescas o "formalinizadas", y realizar una extensión muy fina sobre 2/3 de la superficie de un portaobjetos limpio. 2. Dejar secar completamente a temperatura ambiente. 3. Fijar en metanol durante 5 minutos. 4. Teñir sumergiendo en colorante tricrómico durante 90 minutos a temperatura ambiente, o durante 10 minutos a 50ºC. 5. Aclarar con agua corriente. 6. Lavar el portaobjetos por inmersión agitando durante 10 segundos exactos en alcohol ácido (solución al 0.45% de ácido acético glacial en etanol de 90º). 7. Lavar la preparación en etanol de 95º agitando hasta eliminar el exceso de colorante. 8. Deshidratar en etanol al 95% durante 5 minutos. 9. Deshidratar en etanol absoluto durante 5 minutos. 10. Aclarar en xileno durante 5 a 10 minutos. 11. Montar la preparación con resina de montaje (DPX o Entellán) entre porta y cubre. 12. Examinar al microscopio con el objetivo de inmersión. Las esporas de microsporidios tienen un tamaño de 1.0 x 0.5 µm, se tiñen de color rojo o rosado y presentan una vacuola sin teñir.

INICIO

ATRÁS