Micropráctica de microbiología e higiene alimentaria

Técnico Superior en Dietética Microbiología e higiene alimentaria

Miriam Altur BrinesAbraham Galán Morant

Determinación de microorganismos indicadores de la calidad de alimentos frescos

Organización de la práctica

Se realiza por PAREJAS. Los dos alumnos/compañeros que formáis cada pareja tenéis que trabajar juntos realizando entre los dos cada etapa de los protocolos. NO podéis trabajar en paralelo, es decir, NO se permite que cada uno de vosotros sólo trabaje en un apartado de las prácticas y luego le comunique a su compañero qué ha hecho y los resultados que ha obtenido. El profesor valorará mejor a quiénes hayan TRABAJADO EN EQUIPO. ;-)

Normas básicas de obligado cumplimiento:Utiliza bata y llévala abotonadaUsa guantesLleva el pelo recogidoProhibido comer, beber y fumarNo utilices lentillas No te lleves las manos a la boca, nariz y ojosNo tires nada en la basura ni en la pilaNo saques ninguna muestra del laboratorioLávate las manos (agua jabonosa)Desinfecta superficie trabajo (lejía o alcohol 96º)Si ocurre un accidente, avisad al profesor/a

Horario:

• Lunes (4 h): 9-13 h
• Miércoles (3 h): 9-12 h
• Viernes (4 h): 9-13 h

11 horas totales Lugar: Laboratorio nº 3

Consulta los siguientes documentos disponibles en el Moodle:

• Vídeotutorial sobre las prácticas
• Archivo pdf titulado "Protocolo de la práctica"
• Archivo pdf llamado "Descripción y distribución materiales"
• Infografía de materiales
• Archivo Word titulado "Plantilla para elaborar la memoria de prácticas"
• Vídeo llamado "Recuento de microorganismos aerobios mesófilos"

A cada pareja de alumnos se les entregará una MANZANA como material de partida

Debes traer TODOS los días:

• Libreta para apuntar anotaciones
• Materiales de escritura
• Rotulador permanente para escribir en vidrio y plástico
• Calculadora

Normas obligatorias de utilización del material y equipos comunes (MUY IMPORTANTE): En las prácticas hay que utilizar equipos y materiales comunes para todos, por ejemplo, la balanza. Al utilizarlos, cada pareja de alumnos (seréis 15 parejas en toda la clase) cogerá turno y de forma ordenada y respetuosa iréis empleando los equipos. Si surge algún mal entendido, avisad al profesor para poder aclararlo. TODOS los materiales y equipos están limpios y ordenados al principio de las prácticas y así deben quedar al terminar de trabajar vosotros. Cada pareja deberá asegurarse obligatoriamente de que:

1. Los materiales y equipos están limpios y secos antes de utilizarlos. Si no lo están y otra pareja de compañeros los ha utilizado antes, avisad al profesor para que él hable con esos compañeros.
2. Utilizad con cuidado los equipos y materiales. Ante cualquier duda, consultad al profesor.
3. Limpiad y secad bien TODOS los materiales y equipos que habéis empleado para que los utilice la siguiente pareja de compañeros.
4. La última pareja también debe limpiar el material y los equipos. Además, cuando la última pareja acabe de utilizar los equipos y materiales comunes deberá comunicárselo al profesor.

ATENCIÓN: El material que cada pareja utilice INDIVIDUALMENTE también deberá ser limpiado y secado tras su utilización. Antes de poder abandonar el laboratorio hay que mostrarle al profesor que TODO los materiales tanto los COMUNES como los INDIVIDUALES (de cada pareja) y los equipos están limpios, secos y ordenados.

Recuento de microorganismos aerobios mesófilos en manzana (Cálculo ufc/gr): Indicativo de posible alteración de la muestra. Tinción de Gram: Observación presencia microscópica de microorganismos Gram positivos o Gram negativos en la muestra.

Apartado A

Objetivos de las prácticas

Apartado B

Recuento de los hongos y levaduras en manzana (Cálculo de ufc/gr): Presencia puede conllevar la alteración del alimento. Además pueden suponer un riesgo para la salud humana al ser los agentes productores de micotoxinas.

Distribución temporal de las prácticas

Lunes (4h)

Miércoles (3h)

Viernes (4h)

Día 1

Lunes 4h

En clase (45 minutos): 1. Explicación general de la práctica 2. Explicación específica del día 3. División por parejas (15 grupos) En el laboratorio (3 horas ): 4. Organización de la mesa de trabajo 5. Homogeneizar con el Stomacher 6. Realización de las diluciones 7. Siembra de las placas 8. Limpieza e incubación

Día 2

Miércoles 3h

En clase (45 minutos): 1. Revisón del día anterior 2. Explicación específica del día En el laboratorio (2 horas ): 3. Organización de la mesa de trabajo 4. Recogida de los tubos de las diluciones 5. Siembra de las placas 6. Limpieza e incubación 7. Actividades de repaso

Día 3

Viernes 4h

En clase (30minutos): 1. Revisión de lo realizado el día anterior 2. Explicación específica del día En el laboratorio (3,5 horas ): 3. Organización de la mesa de trabajo 4. Recogida de las placas 5. Recuento de colonias 6. Tinción de gram 7. Observación con el microscopio 8. Limpieza

Evaluación

Limpia y ordena

Respeta y trabaja en equipo

Maneja y cuida correctamente material

Elabora una memoria de prácticas

A

B

C

D

40 %

10%

10%

40%

Notas en ficha personal estudiante (Moodle)

Anota bien qué has hecho, cómo y por qué

Recoge todos los resultados con orden

Texto ordenado y coherente

Entrega en plazo (20 diciembre)

Presentación aseada

¿Cómo elaborar la memoria?

¡Consulta la "Plantilla para elaborar la memoria de prácticas" (Word) del Moodle! Recuerda: Apartados a incluir en la memoria:

• Introducción breve
• Materiales
• Métodos: indicar los pasos realizados durante la práctica
• Resultados: describir detalladamente
• Conclusión breve

Materiales comunes

Muestra

Balanza

Homogeneizador

Placas Petri

Porta- y Cubreobjetos

Medio de cultivo

Ver infografía con la relación de materiales y cantidad

Protocolos a realizar

Lee detenidamente "Protocolo de la práctica" (pdf) en Moodle Consulta con el profesor todas tus dudas

Homogeneizar 25 g de queso con 225 mL de agua autoclavada Realizar 2 diluciones decimales seriadas Sembrar 1 mL diluciones e incubar 3ª dilución tiene 100 ufc Cálculo:

1. Dilución inicial muestra: 25/(25+225) = 25/250 = 1/10
2. Diluciones seriadas: 1/10 (2ª diluc.) y 1/10 (3ª diluc.) FD = 1/10 * 1/10 * 1/10 = 1/1000 FDD = 1/FD = 1000
3. ufc/g = nº de colonias * FDD/Vol inicial sembrado = (100 * 1000)/1 = 100000

ufc/g ó mL = nº de colonias * FDD/Vol inicial sembrado

Cálculo ufc/g

Ejemplo

Imagen de: http://ocw.um.es/cc.-de-la-salud/higiene-inspeccion-y-control-alimentario/practicas-1/practica-1-microorganismos-marcadores-recuento

Considerando: FDD (Factor Decimal de Dilución)= 1/FD FD (Factor de dilución) Vol inicial sembrado = Volumen de la dilución que se ha sembrado en placa expresado en mL

Tinción de Gram

https://www.youtube.com/watch?v=FceD8FFhuew

Foro sobre prácticas en el Moodle:

• Formula tus dudas sobre los procedimientos, resultados obtenidos y conclusiones
• Indica si has aprendido lo que esperabas en estas prácticas
• Comenta los aspectos que mejorarías
• Indica algún aspecto que te haya parecido interesante
• Grado de satisfacción de estas prácticas en general

¡Tu opinión importa!

Gracias por vuestra atención

info@genial.ly

www.genial.ly